1.发情征兆

大熊猫的发情期分为前期、中期、高峰期三个阶段，收集各种发情征兆和行为等信息。(表 1）针对在 2001 年至 2020 年期间在 2 月～6 月里发情并成功交配的 10 起事例，对雄性和雌性的发情阶段进行了分类。(表 2）以交配首日为第 0 天，回溯了发现各种发情征兆的日期（平均±标准差）。雄性和雌性的发情中期和发情高期基本相同，但雌性发情早期通常出现在交配前 1 个月左右，雄性则出现在交配前 2 至 3 个月。

• 表 1.发情阶段的分类

  发情阶段		发情征兆和行为
  手术刀	上半年	做标记, water bath,阴部1级
  	中年	咩叫,对雄性产生兴趣,阴部2级
  		引道黏膜细胞角质形成细胞增加 发情激素水平升高
  	高失业率时期	阴部 3 级、发情激素レベル从峰值下降
  		头雄性偏好 => 交配。
  男子气概	上半年	做标记, bathing
  	中年	对于女性受访者，使用了以下词语。
  	高失业率时期	对雌性表达强烈兴趣，自慰 => 交配

• 表 2.各阶段出现发情征兆的时间

  	上半年	中年	高失业率时期
  女性	-20.0±12.2天	-7.6±1.4天	0.6 ± 0.8 天
  男子气概	2~3 个月	6.3 ± 2.0 天	-2.4 ± 1.9 天

  *以交配第一天为第0天 n=7

用语说明及补充

• 阴部分类：根据症状的颜色和情况（1 至 3 级）。
• 咩叫：发情期固有的叫声
• 阴道黏膜细胞：本园对排泄在尿液中的细胞进行巴氏染色后，分成蓝色有核细胞、红色有核细胞、无核细胞进行计数
• 发情激素:发情激素:本园对尿液中雌激素代谢产物之一的雌酮-3-葡糖苷酸 (Estron-3-Glucuronide,E1G)含量进行测定

2.找准交际交际期

图 1 总结了 2020 年 "梁滨 "E1G 水平的变化，可以看出，在疾病高峰期之前，"梁滨 "呈现出 E1G 水平上升、叫声增多、阴部肿胀发红等现象。最后，在雌雄北极熊互相尖叫，雌性北极熊做出向雄性北极熊展示臀部、向雄性北极熊展示尾巴的动作后，两只北极熊就能生活在一起，并成功交配。报告指出，熊猫的排卵期正是激情强度从高峰急剧下降的时候，因此 2020 年的交配时间也将与排卵期重合。报告指出，在交配前一个周期左右，滋养细胞和酸性细胞交叉，交配前两三天，角质细胞的比例超过其他细胞，因此可以有效地提前预测最佳交配期。通过收集阴道黏膜细胞和脱落尿粪中的细胞，可直接从阴道减少熊的负担。阴道黏膜细胞变化（图 2）显示，嗜酸性细胞和角质形成细胞分别占据优势，随尿液排出的脱落细胞也表现出相的结果。

随尿液排出的阴道黏膜脱落细胞（巴氏染色法）

• 

  发情中期（有核嗜碱性细胞和有核嗜酸性细胞）

• 

  发情高峰期（无核角质形成细胞占优）

图1发情征兆和尿液中E1G水平的变化（20202020 良浜)

图2 尿液中阴道黏膜细胞及e1g的变化（2020年 良浜）

3. 交配条件

白滨野生动物园是自然交配的首选地，目的是实现雌雄繁殖季节的同步，从冬季开始，一直持续到春季，雌雄繁殖地经常更换，排泄物和斑纹的气味也经常更换。最后，从 2001 年到 2020 年，共确定了 14 个交配季节。每次交配都被视为自然交配，只有在 2001 年、2006 年和 2008 年，雌性继续对交配感兴趣，但雄性对雌性失去了兴趣，因此同时采用了人工授精。在 14 次配种中，共产下 11 胎，受孕率为 78.6%。近年来，具有繁殖能力的熊猫个体老龄化问题日益突出。例如，2016 年（24 岁），雄性熊猫 "永明 "不得不暂缓交配所需的体能，让它在最短的时间内与雌性熊猫交配 7 个小时以上，交配间隔休息 7 个小时以上。

白滨野生动物园的大熊猫交配情况