1.發情徵兆

大熊貓發情期的三個階段分為前期、中期、高峰期三個階段，收集各種發情徵兆和行為等信息。(Table 1)針對在2001年至2020年期間在2月～6月里發情並成功交配的10起事例，對雄性和雌性的發情階段進行了分類。(表 2）以交配首日為第 0 天，回溯了發現各種發情徵兆的日期（平均±標準差）。雄性和雌性的發情中期和發情高期基本相同，但雌性發情早期通常在交配前 1 個月左右出現，雄性則在交配前 2~3 個月出現。

• 表 1.發情階段的分類

  發情階段		發情徵兆和行為
  解剖刀	上半年	做標記, 水浴,阴部1級
  	中年	咩叫,對雄性產生興趣,阴部2級
  		引道黏膜細胞角質形成細胞增加 發情激素水平升高
  	發情高峰期	陰部3級、發情激素レベル從峰值下降
  		頭雄性偏好 => 交配。
  男子氣概	上半年	做標記, 洗澡
  	中年	對於女性受訪者，則使用下列字眼。
  	發情高峰期	對於女性表達強烈的性興趣，自慰 => 交配

• 表 2.各個階段出現發情徵兆的時間

  	上半年	中年	發情高峰期
  女性	-20.0 ± 12.2 天	-7.6 ± 1.4 天	0.6 ± 0.8 天
  男子氣概	2~3 個月	6.3 ± 2.0 天	-2.4 ± 1.9 天

  *以交配第一天為第0天 n=7

用語说明及补充

• 陰部分類：根據顏色和症狀狀況分類（1 至 3 級）。
• 咩叫：發情期固有的叫聲
• 陰道黏膜細胞：本園對排泄在尿液中的細胞進行巴氏染色後，分成藍色有核细胞、紅色有核细胞、無核细胞進行統計。
• 發情激素:發情激素:本園對尿液中雌激素代谢产物之一的雌酮-3-葡糖苷酸 (Estron-3-Glucuronide,E1G)含量進行测定

2. 找准交接交接期

2020 年 "Ryahama 「E1G 水平的變化總結如圖 1 所示，在疾病高峰期之前，」Ryahama "呈現 E1G 水平上升、鳴叫聲增加、鳴叫聲數量增加、陰部腫脹發紅等現象。最後，雄性與雌性北極熊互叫，雌性北極熊做出向雄性展示臀部、向雄性展示尾巴的姿勢後，兩頭北極熊就生活在一起，交配成功。報告指出，熊貓的排卵期正值激情強度水平從高峰急劇下降的時候，因此2020年的交配時間也會與排卵期重合。報告指出，在交配前約一個週期，滋養細胞和酸性細胞交叉，在交配前2~3天，角質細胞的比例超過其他細胞，因此可以有效地提前預測最佳交配期。由於陰道黏膜細胞的收集和尿液糞便細胞的脫落，直接從陰道減輕了熊的負擔。The change of 阴道黏膜细胞变化(图 2)显示，嗜酸性细胞和角质形成细胞分别占据优势，随尿液排出的脱落细胞也表现出相的结果。

随尿液排出的阴道黏膜脱落细胞（巴氏染色法）

• 

  發情中期(有核嗜碱性细胞和有核嗜酸性细胞)

• 

  發情高峰期(無核角質形成細胞佔優)

图1发情征兆和尿液中E1G水平的变化（20202020 良浜)

圖2尿液中陰道黏膜細胞及e1g的變化（2020年 良浜）

3. 交配條件

白濱野生動物園是自然交配的第一選擇，目的是實現雌雄繁殖季節的同步，從冬季開始，一直持續到春季，經常更換雌性和雄性的繁殖地點，並聞其排泄物和斑紋的氣味。最後，從 2001 年到 2020 年，已確定 14 個交配季節。每次交配都被視為自然交配，只有在2001年、2006年和2008年，雌性繼續對交配有興趣，但雄性對雌性失去興趣，所以同時使用人工授精。在14次的配種中，共產下11胎，受孕率為78.6%。近年來，有繁殖能力的熊貓個體老化的問題越來越明顯。例如，2016年（24歲），雄性熊貓 「永明 」因交配所需的體能問題，不得不暫緩交配，讓它在最短的時間內與雌性熊貓交配7個小時以上，交配之間休息7個小時以上。

白濱野生動物園的大熊貓交配情況